MLS №

DW19092776

Тип недвижимости

Односемейный

Статус

Спальни

3

Ванные комнаты

2 Полный

Год постройки

1935

квадратных футов

1896
кв. футов

Цена за кв. Ft.

$ 341,77

Размер лота

0,25

Рассказы

1

Гараж

да

— 3
пробелы

Уезд

Лос-Анджелес

Район

El Monte Union High

Комнаты

Семейный номер, гостиная, подсобное помещение

Прачечная

Подключение сушилки, подключения в гараже

Охлаждение

Нет

Гостевой дом

3

Камины

Нет камина

Дополнительные элементы интерьера

Крючок для шайб

Парковка

3 гаражных места. 3 парковочных места.

Бассейн

Нет

Зонирование

EMR1AY

Дополнительные внешние / особенности партии

Тротуары.

Налог / код собственности

8568015020

Получать электронное письмо , как только цена изменится

Получите электронное письмо

, как только цена изменится

Получать оповещения о ценах

Введите свой рабочий адрес, чтобы узнать фактическое время в пути с загруженностью по этому объекту.

Расчет …

Вот время INRIX в будние дни в пути от этого свойства до . Сменить адрес

Walk Score измеряет пешеходную доступность любого адреса, Transit Score измеряет доступность общественного транспорта по шкале от 1 до 100.

Посмотреть больше
Посмотреть меньше

Сколько дома я могу себе позволить?

Пройдите предварительную квалификацию сегодня и узнайте больше.

Начать

Этот контент последний раз обновлялся 07. 11.2020 3:08:00. Некоторые объекты недвижимости, выставленные на продажу на этом веб-сайте, могут впоследствии быть проданы или больше не доступны.

Информация считается надежной, но не гарантируется.

TNT003, ингибитор сериновой протеазы C1s, предотвращает активацию комплемента, вызванную холодовыми агглютининами | Кровь

Система комплемента — это семейство белков плазмы, которые обеспечивают гуморальный иммунный надзор. Активация комплемента приводит к ферментативному каскаду, ведущему к производству опсонинов и анафилатоксинов, ответственных за очищение от патогенов и инициирование воспаления.Комплемент может запускаться одним из трех различных путей: классическим путем (CP), альтернативным путем (AP) или лектиновым (LP) путем. Активация различных путей опосредуется специфическими для пути белками, которые распознают молекулярные паттерны патогенов. В случае ХП активация осуществляется иммунными комплексами, содержащими связывающие комплемент антитела. Хотя комплемент является одной из первых линий защиты от инфекции, гиперактивность определенных путей была описана при многочисленных аутоиммунных и воспалительных заболеваниях. ^1-3 При таких показаниях терапевтическое вмешательство путем предотвращения активации комплемента может иметь клиническое применение. ⁴

Болезнь холодовых агглютининов (КА) (ИБС) — это редкая форма аутоиммунной гемолитической анемии (АИГА), составляющая примерно 15% всех случаев АИГА с зарегистрированным уровнем заболеваемости ∼1 / 1 000 000. ⁵ Помимо анемии, пациенты часто жалуются на утомляемость, гемоглобинурию и феномен Рейно. ^6-10 Болезнь вызывается CA, моноклональными антителами к иммуноглобулину M (IgM), которые связываются с антигеном I на поверхности красных кровяных телец (RBC) в соответствии с их тепловой амплитудой — температурой, ниже которой связываются CA. ¹¹ C1-комплекс, мультимерный комплекс, состоящий из рецептора распознавания паттернов C1q и сериновых протеаз C1r и C1s, связывается с иммунным комплексом CA-RBC для активации CP, что приводит к поверхностному отложению опсонинов комплемента. ^9,11-13 Покрытые комплементом эритроциты затем поглощаются клетками системы мононуклеарных фагоцитов, этот процесс называется внесосудистым гемолизом (EVH). ^6,13,14 В редких случаях, например, во время повышенного иммунного ответа, активация CP может также привести к образованию комплекса мембранной атаки (MAC) и разрыву эритроцитов, процессу, известному как внутрисосудистый гемолиз (ВЖК). ^15,16 Таким образом, гиперактивный ХП, управляемый СА, считается ответственным за потерю эритроцитов и анемию у пациентов с ИБС.

Доказательства активности ХП у пациентов с ИБС получены из анализа белков комплемента в их циркуляции. По сравнению со здоровыми людьми, образцы сыворотки пациентов с ИБС являются гипокомплементемными для компонентов в CP, таких как C4, что предполагает потребление этих субстратов из-за активности пути. ⁸ Кроме того, в отличие от здоровых людей, циркулирующие эритроциты у пациентов с ИБС покрыты фрагментами C3, что свидетельствует о том, что активация комплемента происходит на поверхности эритроцитов. ^8,9,11,12 Действительно, клиническим маркером, используемым для диагностики пациентов с ИБС, является отложение C3d на эритроцитах с использованием прямого антиглобулинового теста. ^{6,7,17 ​​}

Здесь мы описываем эффекты TNT003, мышиного моноклонального антитела (mAb) иммуноглобулина G2a (IgG2a), нацеленного на CP-специфическую сериновую протеазу C1s в анализах гемолиза ex vivo с 40 уникальными образцами плазмы пациентов с ИБС. Мы обнаружили, что аутоантитела пациентов с ИБС вызывают значительное отложение фрагментов комплемента на человеческих эритроцитах, что приводит к поглощению эритроцитов макрофагоподобными клетками THP-1. Мы показываем, что TNT003 предотвращает отложение комплемента, управляемое СА, на эритроцитах, и что эти эритроциты спасаются от фагоцитоза.Кроме того, образование анафилатоксина и гемолиз, вызванные активацией комплемента СА, также предотвращаются в присутствии TNT003. Наконец, анализ плазмы пациентов показал, что образцы ИБС содержат пониженные уровни компонентов ЦП выше по течению, но не С5, что свидетельствует об активности ЦП в плазме пациентов с ИБС, которая прекращается до начала терминального каскада. Наши результаты подтверждают терапевтическое использование селективного предшествующего ингибитора CP для лечения ИБС.

Для количественного определения уровней C1s в плазме планшеты для иммуноферментного анализа с высоким связыванием (Costar) покрывали 100 нг антитела против C1s на лунку (Abcam, Cambridge, MA) и инкубировали в течение ночи при 4 ° C.Затем удаляли белковый раствор и планшет блокировали 250 мкл фосфатно-солевого буфера Дульбекко (DPBS) плюс 1% казеин при комнатной температуре в течение 2 часов, затем промывали 2 раза 300 мкл DPBS. Образцы плазмы разбавляли 1: 400 в DPBS, содержащем 0,1% полиоксиэтилен (20) сорбитанмонолаурат и 20 мМ EDTA (DPBS-TE). 24-точечная стандартная кривая неактивных C1s (технология комплемента) была построена путем двукратных серийных разведений 1 мкг / мл неактивных C1s в DPBS-TE. Затем в планшет добавляли 100 мкл стандарта или плазмы, инкубировали при комнатной температуре в течение 2 часов, затем промывали 5 раз 300 мкл DPBS-TE.Затем 100 нг биотинилированного TNT003 добавляли в каждую лунку при комнатной температуре в течение 1 часа, а затем промывали 5 раз. Затем 100 мкл стрептавидин пероксидазы хрена (разведение 1: 2000; Southern Biotech) добавляли в каждую лунку при комнатной температуре в течение 1 часа. Планшеты промывали 5 раз и добавляли 100 мкл субстрата ультра 3,3 ‘, 5,5’-тетраметилбензидина (Thermo Scientific). Цвет проявлялся в течение 5 минут, и реакцию останавливали 100 мкл 1 н. Серной кислоты. Оптическую плотность (OD = 450 нм) считывали на спектрофотометре, а концентрацию C1s в плазме интерполировали по стандартной кривой.

Уровни C3a, C4a и C5a в супернатантах анализа гемолиза были количественно определены с помощью ELISA (OptEIA; BD Biosciences). Количественные уровни эндогенных анафилатоксинов в NHS вычитали для построения кривых зависимости реакции от концентрации TNT003. ELISA использовали для количественного определения C4 (Abnova, Тайбэй, Тайвань), C2 (Abcam) и C5 (Abnova) в ИБС и здоровой плазме. ELISA выполняли согласно протоколу производителя.

Чтобы проверить гипотезу о том, что CA-индуцированное отложение комплемента на hRBCs способствует эритрофагоцитозу, мы использовали фагоцитарную клеточную линию THP-1. Мы обнаружили, что hRBC, пресенсибилизированные в нормальной плазме человека и подвергнутые воздействию NHS, показали небольшое отложение комплемента на поверхности клеток (красные столбцы) и небольшое поглощение (черные столбцы) клетками THP-1 (нормальная плазма плюс 25% NHS; рис. 3A). Подобные уровни отложения комплемента и фагоцитоза наблюдались в клетках, пресенсибилизированных в плазме пациентов с CA, но не подвергавшихся воздействию NHS (No NHS).Напротив, пресенсибилизированные CA hRBCs, подвергнутые воздействию NHS, показали значительное количество отложений C3-фрагментов и продемонстрировали примерно четырехкратное увеличение поглощения клетками THP-1 по сравнению с контролем (рис. 3A-B).

Рисунок 3

TNT003 предотвращает фагоцитоз hRBCs, подвергнутых воздействию образцов плазмы пациентов с ИБС и NHS. (A) Типичный пример анализа фагоцитоза, проведенного с использованием одного образца пациента.Меченные CellTracker Green hRBC, сенсибилизированные в плазме и впоследствии подвергшиеся воздействию 25% NHS, инкубировали в присутствии обработанных ретиноевой кислотой клеток THP-1 для индукции фагоцитоза. hRBC, сенсибилизированные в присутствии нормальной плазмы человека и впоследствии подвергнутые воздействию NHS, показали небольшое отложение фрагментов C3 на поверхности клеток (красные столбцы, правая ось Y) и были минимально поглощены клетками THP-1 (черные столбцы, левая ось Y ), аналогично тому, что наблюдалось с CA-сенсибилизированными hRBC, не подвергавшимися воздействию NHS. Напротив, CA-сенсибилизированные hRBC, подвергнутые воздействию NHS, демонстрируют значительное отложение фрагмента C3 на их клеточной поверхности и легко фагоцитируются клетками THP-1.Воздействие NHS в присутствии mAb IC IgG2 или mAb против C5 (оба 100 мкг / мл) не предотвращало отложение фрагмента C3 или фагоцитоз эритроцитов. Напротив, TNT003 (100 мкг / мл) предотвращал как отложение C3-фрагмента, так и фагоцитоз hRBC. (B) Гистограмма, изображающая данные, полученные из 10 различных экспериментов с использованием 5 отдельных образцов пациентов с ИБС (2 эксперимента на образец пациента). Данные нормализованы к контролю (плазма CAD плюс 25% NHS) как для фагоцитоза, так и для отложения фрагмента C3 во всех экспериментах.

Рисунок 3

TNT003 предотвращает фагоцитоз hRBCs, подвергнутых воздействию образцов плазмы пациентов с ИБС и NHS. (A) Типичный пример анализа фагоцитоза, проведенного с использованием одного образца пациента. Меченные CellTracker Green hRBC, сенсибилизированные в плазме и впоследствии подвергшиеся воздействию 25% NHS, инкубировали в присутствии обработанных ретиноевой кислотой клеток THP-1 для индукции фагоцитоза. hRBC, сенсибилизированные в присутствии нормальной плазмы человека и впоследствии подвергнутые воздействию NHS, показали небольшое отложение фрагментов C3 на поверхности клеток (красные столбцы, правая ось Y) и были минимально поглощены клетками THP-1 (черные столбцы, левая ось Y ), аналогично тому, что наблюдалось с CA-сенсибилизированными hRBC, не подвергавшимися воздействию NHS.Напротив, CA-сенсибилизированные hRBC, подвергнутые воздействию NHS, демонстрируют значительное отложение фрагмента C3 на их клеточной поверхности и легко фагоцитируются клетками THP-1. Воздействие NHS в присутствии mAb IC IgG2 или mAb против C5 (оба 100 мкг / мл) не предотвращало отложение фрагмента C3 или фагоцитоз эритроцитов. Напротив, TNT003 (100 мкг / мл) предотвращал как отложение C3-фрагмента, так и фагоцитоз hRBC. (B) Гистограмма, изображающая данные, полученные из 10 различных экспериментов с использованием 5 отдельных образцов пациентов с ИБС (2 эксперимента на образец пациента).Данные нормализованы к контролю (плазма CAD плюс 25% NHS) как для фагоцитоза, так и для отложения фрагмента C3 во всех экспериментах.

Затем мы проверили способность TNT003 предотвращать CA-опосредованное комплемент-зависимое поглощение hRBCs. Когда воздействие CA-пресенсибилизированных hRBCs на NHS происходило в присутствии 100 мкг / мл TNT003, как отложение C3-фрагмента, так и фагоцитоз снижались до контрольных уровней, аналогично тому, что наблюдалось в 10 мМ EDTA (рис. 3A-B).Напротив, ни mAb против C5, ни IC не показали ингибирования отложения фрагмента C3 или фагоцитоза. Наконец, мы проверили, присутствует ли комплекс TNT003-C1 на поверхности hRBC. Мы обнаружили, что в присутствии CA TNT003 может быть обнаружен на hRBC с помощью проточной цитометрии, вероятно, связанный с комплексом C1, который, в свою очередь, связан с CA. Однако при нагревании (что могло бы происходить in vivo, когда эритроциты циркулируют в печени) связанные с CA комплексы TNT003-C1 диссоциируют от hRBCs (данные не показаны).

Поскольку CP сильно зависит от свободного кальция и магния, мы подвергали пресенсибилизированные CA hRBCs воздействию NHS в присутствии или в отсутствие 10 мМ EDTA, чтобы оценить, способны ли образцы индуцировать прямой клеточный лизис hRBCs. Мы обнаружили, что образцы CAD индуцировали некоторый лизис hRBCs, даже в присутствии 10 мМ EDTA, предполагая, что in vitro сенсибилизация hRBCs в плазме CAD вызывает некоторый комплемент-независимый лизис. ¹⁸ Однако из 40 протестированных образцов CAD только плазма от пациента 5 (P5), образец, который, как было установлено, содержал самые высокие титры CAs как при 4 ° C, так и при 24 ° C (дополнительная таблица 1), продемонстрировал значительное количество EDTA зависимый гемолиз. В зависимости от концентрации TNT003 полностью ингибировал комплемент-зависимый лизис Р5-сенсибилизированных hRBCs с IC ₅₀ 5,1 мкг / мл (34 нМ; фиг. 4A).

Рисунок 4

TNT003 предотвращает CA-опосредованный лизис hRBC и образование анафилатоксина. (A) hRBCs, подвергнутые воздействию образца плазмы P5 CAD с последующим воздействием 25% NHS, показали комплемент-зависимый гемолиз, который ингибировался TNT003, но не IC, зависимым от концентрации образом (IC ₅₀ = 5,1 мкг / мл; 34 нМ ). Супернатант этих экспериментов анализировали на C4a (B; IC ₅₀ = 5,2 мкг / мл; 35 нМ), C3a (C; IC ₅₀ = 5,2 мкг / мл; 35 нМ) и C5a (D; IC _{). 50} = 4,9 мкг / мл; 33 нМ) с помощью ELISA на планшете. Данные нормализованы к контролю (плазма P5 плюс 25% NHS) и отображают среднее значение 3 экспериментов.

Рис. 4

TNT003 предотвращает CA-опосредованный лизис hRBC и образование анафилатоксина. (A) hRBCs, подвергнутые воздействию образца плазмы P5 CAD с последующим воздействием 25% NHS, показали комплемент-зависимый гемолиз, который ингибировался TNT003, но не IC, зависимым от концентрации образом (IC ₅₀ = 5,1 мкг / мл; 34 нМ ). Супернатант этих экспериментов был проанализирован на C4a (B; IC ₅₀ = 5,2 мкг / мл; 35 нМ), C3a (C; IC ₅₀ = 5,2 мкг / мл; 35 нМ) и C5a (D; IC _{). 50} = 4.9 мкг / мл; 33 нМ) с помощью ELISA на планшетах. Данные нормализованы к контролю (плазма P5 плюс 25% NHS) и отображают среднее значение 3 экспериментов.

Используя супернатант из экспериментов по гемолизу, проведенных с плазмой P5, мы выяснили, способен ли TNT003 предотвращать производство анафилатоксинов. Мы обнаружили, что TNT003 ингибирует образование C4a, C3a и C5a, вызванное плазмой P5, в зависимости от концентрации (рис. 4B-D).

CAD — это форма AIHA, при которой аутоантитела связываются с эритроцитами при низких температурах, чтобы активировать CP на поверхности клетки, что приводит к потере эритроцитов и анемии. Хотя болезнь часто описывается как вялотекущая, половина всех пациентов становятся зависимыми от переливания крови в какой-то момент в течение болезни. ^6,7 Хотя у многих здоровых людей в кровообращении присутствуют КА, тепловая амплитуда аутоантител, а также их титр низкие, и в подавляющем большинстве случаев клинические проявления болезни не проявляются. ^10,17,19 У пациентов с ИБС высокие титры СА часто приписываются лимфопролиферативному В-клеточному нарушению, которое выявляется примерно у 75% пациентов с хронической ИБС. ⁵ Помимо титра, критическим параметром, определяющим тяжесть заболевания, является тепловая амплитуда антитела. Антитела с высокими тепловыми амплитудами остаются связанными с эритроцитами в течение более длительных периодов времени во время циркуляции, тем самым повышая вероятность активации комплемента. Кроме того, из-за ферментативной природы каскада активация комплемента более эффективна при более высоких температурах.Таким образом, для пациентов с высоким титром и высокой тепловой амплитудой СА заболевание может быть изнурительным и изменяющим жизнь до такой степени, что пациенты принимают чрезвычайные меры, чтобы избежать холода или даже умеренных температур.

Считается, что анемия у пациентов с ИБС является результатом активации ЦП на эритроцитах СА. ^9,13 Действительно, наши данные показывают сильную корреляцию между титрами СА и отложением комплемента (рис. 2).Мы обнаружили, что, хотя большинство образцов плазмы ИБС вызывало отложение комплемента на эритроцитах, 12 (30%) этого не сделали. При дальнейшем анализе 10 из этих 12 имели титры СА ≤256 (дополнительная таблица 1). Поскольку известно, что титр СА у пациентов с ИБС колеблется и, как было показано, отслеживается при гемолизе, ¹¹ наши результаты предполагают, что эти образцы были получены во время относительно спокойной фазы болезни для этих пациентов.

У большинства пациентов с ИБС аутоантитело представляет собой IgM, ^5,10 , поливалентный иммуноглобулин, способный активировать комплекс С1, триггер CP.Это событие связывания вызывает авторасщепление сериновой протеазы C1r, которая расщепляет зимогенную форму C1s. Затем активированные C1s расщепляют растворимые C4 и C2 с образованием мембраносвязанной конвертазы C3, ответственной за расщепление C3 и отложение опсонина C3b на поверхности эритроцитов. Фактор I расщепляет C3b на iC3b, который сохраняет опсоническую активность, но дальнейшее преобразование в C3d ослабляет ее. ⁹ Распознавание клеток, покрытых C3b / iC3b, рецепторами комплемента на фагоцитах, приводит к удалению этих клеток из кровотока через EVH (рис. 6). ^6,20,21 Мы показываем, что TNT003 ингибирует CA-опосредованное отложение фрагмента C3 на эритроцитах, одновременно предотвращая их поглощение макрофагоподобными клетками THP-1 (рис. 3). Наконец, мы показываем, что TNT003 также предотвращает производство анафилатоксинов C4a, C3a и C5a, управляемых CA (рис. 4B-D). Хотя подавление производства анафилатоксинов может ослабить воспалительные реакции на инфекции, их производство может привести к обострению аутоиммунной патологии. В мышиной модели пассивного переноса AIHA активация клеток Купфера C5a требовалась для развития полномасштабного AIHA. ²² Авт. Предлагают механизм, с помощью которого C5a индуцирует повышающую регуляцию экспрессии FcγR на поверхности клеток Купфера, что приводит к удалению эритроцитов посредством EVH. Хотя авторы не проверяли наличие рецепторов комплемента (CR), сообщалось о C5aR-опосредованной активации фагоцитарного медиатора CR3 (CD11b) на лейкоцитах. ^23,24 Таким образом, предотвращая CA-опосредованное производство анафилатоксинов, TNT003 может также предотвращать CR-зависимое поглощение C3b / iC3b-опсонизированных эритроцитов.

Рисунок 6

Активация СА классического пути комплемента на эритроцитах приводит к анемии у пациентов с ИБС. (1) CA-связанные RBC фиксируют C1, CP-активирующий комплекс, на поверхности RBC, что запускает классический каскад комплемента. (2) Активация CP приводит к отложению опсонина комплемента (C3b) на поверхности RBC. (3) Как правило, активность CP прекращается после расщепления C3, и C3b / iC3b-опсонизированные эритроциты затем перемещаются в печень, где они фагоцитируются резидентными в печени макрофагами — процесс, называемый внесосудистым гемолизом. (4) В исключительных обстоятельствах, таких как иммунологический стресс, который индуцирует продукцию белков комплемента, может происходить активация каскада терминального комплемента, что приводит к образованию комплекса мембранной атаки и прямого лизиса клеток, известного как внутрисосудистый гемолиз. Ингибируя активацию классического пути комплемента на уровне комплекса C1, расположенный выше ингибитор CP, такой как TNT003, может предотвращать как внесосудистый, так и внутрисосудистый гемолиз.

Рис. 6

Активация СА классического пути комплемента на эритроцитах приводит к анемии у пациентов с ИБС. (1) CA-связанные RBC фиксируют C1, CP-активирующий комплекс, на поверхности RBC, что запускает классический каскад комплемента. (2) Активация CP приводит к отложению опсонина комплемента (C3b) на поверхности RBC. (3) Как правило, активность CP прекращается после расщепления C3, и C3b / iC3b-опсонизированные эритроциты затем перемещаются в печень, где они фагоцитируются резидентными в печени макрофагами — процесс, называемый внесосудистым гемолизом. (4) В исключительных обстоятельствах, таких как иммунологический стресс, который индуцирует продукцию белков комплемента, может происходить активация каскада терминального комплемента, что приводит к образованию комплекса мембранной атаки и прямого лизиса клеток, известного как внутрисосудистый гемолиз.Ингибируя активацию классического пути комплемента на уровне комплекса C1, расположенный выше ингибитор CP, такой как TNT003, может предотвращать как внесосудистый, так и внутрисосудистый гемолиз.

ВЖК у пациентов с ИБС — редкое явление. ⁶ Связанные с мембраной регуляторные белки комплемента CD55 (фактор ускорения распада) и CD59, вероятно, ответственны за ослабление активации комплемента на поверхности эритроцитов и предотвращение образования MAC и последующего IVH.В самом деле, чтобы вызвать комплемент-зависимый гемолиз, опосредованный образцами CAD, в предыдущих исследованиях использовались эритроциты пациентов с пароксизмальной ночной гемоглобинурией (PNH), у которых отсутствует поверхностная экспрессия как CD55, так и CD59. ^11,25 Из 40 образцов CAD, которые мы протестировали, только образец P5 был способен непосредственно индуцировать лизис эритроцитов под действием MAC (рис. 4A). Таким образом, ВЖК при ИБС встречается редко, но может возникать после воздействия сильного холода или при иммунологическом стрессе, который индуцирует выработку белков комплемента, которые приводят к активации концевого каскада комплемента. ¹⁶ Наш анализ белков комплемента в образцах плазмы от 40 пациентов с ИБС показывает, что ранние компоненты ХП C1s, C4 и C2 обнаруживаются на значительно более низких уровнях по сравнению со здоровыми образцами, что согласуется с результатами предыдущих исследований. ⁸ Уровни C5, однако, были сопоставимы между образцами здоровых и пациентов с ИБС. Взятые вместе, эти результаты предполагают, что CA-управляемая активность CP обычно прекращается после расщепления C3.

Эти результаты подтверждают идею о том, что разрушение эритроцитов у пациентов с ИБС происходит в основном в результате EVH, вызванного вышестоящими опсонинами CP. Тем не менее TNT003 за счет блокирования на уровне комплекса C1 предотвращает как отложение C3b, так и образование MAC. Таким образом, использование проксимального ингибитора CP предотвратит как EVH, ответственный за хроническую анемию низкой степени, характерную для спокойной фазы заболевания, так и, хотя и продемонстрированный здесь только на одном образце пациента, вероятно, эпизодический IVH, который возникает во время острого гемолитического криза. .

ИБС — редкое заболевание, для которого не существует одобренной терапии.Было показано, что использование ритуксимаба, mAb против CD20, не по назначению является эффективным для достижения частичного ответа у подгруппы пациентов с ИБС, хотя у большинства пациентов в конечном итоге наблюдается рецидив. ^26-28 В некоторых случаях флударабин, химиотерапевтический агент, используемый для лечения гематологических злокачественных новообразований, использовался в комбинации с ритуксимабом и показал многообещающие результаты в обеспечении полного ответа у некоторых пациентов. ²⁹ Однако пациенты с ИБС имеют тенденцию быть пожилыми, и предпочтение отдается избеганию использования химиотерапевтических агентов в такой популяции пациентов. ³⁰

Поскольку потеря эритроцитов, опосредованная комплементом, является основной причиной анемии при ИБС, альтернативным подходом к лечению может быть использование ингибиторов комплемента. Хотя подавление комплемента вряд ли сможет контролировать лежащее в основе лимфопролиферативное заболевание, оно может изменить заболевание, предотвращая гемолиз и анемию, вызванные СА. Доказано, что ингибиторы комплемента безопасны и эффективны для лечения нескольких гематологических заболеваний.Экулизумаб (Солирис), mAb против C5, используется для лечения ПНГ и атипичного гемолитико-уремического синдрома. ^31-34 Оба заболевания вызваны неконтролируемой активностью АР на поверхности эритроцитов, что приводит к гемолитической анемии. Ингибитор C1 (C1-INH) (CINRYZE; Berinert), эндогенный белок плазмы, ответственный за регулирование активности комплемента, в настоящее время используется для лечения наследственного ангионевротического отека. ^35-37 В отчетах о клинических случаях описано успешное использование как экулизумаба, так и C1-INH для лечения CAD ¹⁵ и теплого AIHA, ³⁸ соответственно, что подчеркивает роль комплемента в развитии патологии AIHA.Однако, поскольку экулизумаб блокирует только каскад терминального комплемента, использование экулизумаба при ИБС будет ограничено наиболее тяжелыми случаями ИБС, при которых ВЖК является хронической проблемой. Как показано на фиг. 3A, ингибирование C5 не предотвращает отложение опсонина комплемента выше по течению и, фактически, может усугубить EVH, возникающий у пациентов с ИБС. Действительно, эритроциты от пациентов с ПНГ, получавших экулизумаб, накапливают опсонины C3 на поверхности своих клеток. В результате эти эритроциты, которые в отсутствие экулизумаба подверглись бы ВЖК, теперь потенциально подвергаются ЭВГ, о чем свидетельствует их секвестрация в печени и селезенке пациентов с ПНГ, принимающих экулизумаб. ^39,40 C1-INH, в отличие от экулизумаба, ингибирует активацию комплемента перед отложением опсонина. Однако эндогенные уровни C1-INH в плазме составляют ~ 200 мкг / мл. Таким образом, в одном отчете об успешном применении C1-INH для теплого AIHA авторы вливали 13 000 U C1-INH в течение 50 часов, чтобы предотвратить потерю перелитых концентратов эритроцитов. ³⁸ Хотя он был эффективен в предотвращении гемолиза, режим дозирования, необходимый для достижения терапевтически значимых концентраций выше и без того высоких уровней эндогенного C1-INH в плазме, может оказаться непрактичным при хронических заболеваниях, таких как ИБС или теплый AIHA.

Результаты этого исследования доказывают, что ингибитор C1s может предотвращать активацию комплемента, вызванную СА, у пациентов с ИБС. В отличие от экулизумаба, который ингибирует концевой каскад комплемента, управляемый всеми путями комплемента, или C1-INH, который ингибирует как CP, так и LP, белки, специфичные для пути нацеливания, такие как C1s, обеспечивают преимущество избирательного ингибирования только гиперактивного пути, оставляя другие ветви дополнения для иммунного надзора. Хотя представленные здесь данные были получены на образцах плазмы пациентов с ИБС, ингибитор ХП может оказаться полезным при других гематологических заболеваниях, таких как АИГА, а также в других терапевтических областях, в которых активность ХП вызывает патологию заболевания. Приведенные здесь данные подтверждают разработку гуманизированной формы TNT003 для лечения ИБС и других заболеваний, опосредованных ХП.

К этой статье в этом выпуске есть комментарий Inside Blood .

Онлайн-версия этой статьи содержит дополнение с данными.

Расходы на публикацию этой статьи были частично оплачены за счет оплаты страницы. Поэтому и исключительно для того, чтобы указать на этот факт, данная статья помечена как «реклама» в соответствии с разделом 18 USC 1734.

Вклад: J.S., E.L.R. и S.P. разработали исследование; J.S., E.L.R., A.S. и S.H. провели исследование и проанализировали данные; N.E.S. и G.C.P. предоставил ценные предложения и рекомендации; и Дж. и С.П. написали рукопись.

Раскрытие информации о конфликте интересов: авторы работают и являются акционерами True North Therapeutics, Inc. N.E.S. является членом правления.

Переписка: Сэндип Паникер, True North Therapeutics, Inc., 951 Gateway Blvd, Южный Сан-Франциско, Калифорния, 94080; электронная почта: [email protected]

.